分子伴隨診斷是臨床預(yù)測患者響應(yīng)免疫藥物幾率的核心環(huán)節(jié)，其中，基于腫瘤組織細(xì)胞的程序性死亡配體-1（programmed cell death-Ligand 1，PD-L1）表達(dá)水平評估免疫治療獲益性是目前最常見與最成熟的手段。不幸的是，部分晚期患者不滿足手術(shù)或穿刺指征導(dǎo)致無法獲取腫瘤組織樣本，因此亟需開發(fā)依托于液體活檢技術(shù)的免疫用藥指導(dǎo)方案。
允英醫(yī)療聯(lián)合上海市瑞金醫(yī)院開展臨床科研攻關(guān)，借助于允英自主研發(fā)的采血管產(chǎn)品、RNAplus?高效RNA提取技術(shù)、Alldetect? qPCR檢測平臺以及IHC檢測平臺，對比了PD-L1在胃腸癌患者血漿樣本與腫瘤組織樣本間的表達(dá)關(guān)聯(lián)性，并首次明確血漿PD-L1表達(dá)可能是胃癌患者響應(yīng)帕博利珠單抗（Pembrolizumab，可瑞達(dá)）治療的重要預(yù)測指標(biāo)。
為了探索基于血液樣本檢測PD-L1的液體活檢方案是否可行，本研究首先在TCGA（The Cancer Genome Atlas）公共數(shù)據(jù)庫中調(diào)查了胃癌（stomach adenocarcinoma，STAD）、結(jié)腸癌（colon adenocarcinoma，COAD）以及直腸癌（rectum adenocarcinoma，READ）患者腫瘤組織中PD-L1表達(dá)水平與患者特征間的相關(guān)性。結(jié)果表明，PD-L1在胃腸道腫瘤組織中的表達(dá)水平不受患者的年齡、性別等因素影響。此外，盡管PD-L1表達(dá)水平與結(jié)腸癌患者腫瘤分期、直腸癌患者一線治療預(yù)后存在顯著相關(guān)性（p < 0.05），但總體上并未發(fā)現(xiàn)不同PD-L1表達(dá)水平的胃腸癌患者間存在統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著的生存期差異，提示胃腸癌患者總生存時(shí)間與患者PD-L1表達(dá)間不具有相關(guān)性，初步明確了不同患者間基線差異不會(huì)干擾PD-L1表達(dá)定量結(jié)果。
研究隊(duì)列由52名胃腸癌患者構(gòu)成，入組人員均使用允英采血管采集10 mL血液樣本，同時(shí)還提供了配對腫瘤組織樣本作為對照?；颊哧?duì)列按照不同病理類型分為胃癌（23人，44.2%）、結(jié)腸癌（19人，36.5%）與直腸癌（10人，19.2%），依托允英IHC檢測平臺完成了組織中PD-L1表達(dá)水平，并以1%作為cut-off閾值將不同病理患者細(xì)分為PD-L1 IHC陰性與陽性隊(duì)列。值得注意的是，無論胃癌，結(jié)腸癌還是直腸癌，PD-L1 IHC表達(dá)檢測或qPCR檢測結(jié)果均與組織樣本中腫瘤細(xì)胞含量無顯著相關(guān)性，繼續(xù)排除了由樣本中腫瘤細(xì)胞數(shù)量差異造成的潛在干擾因素。
隨后，本研究對比了不同方法檢測PD-L1表達(dá)水平的一致性。結(jié)果提示，經(jīng)組織IHC評估的陽性組胃腸癌患者中，采取qPCR定量法獲得的PD-L1表達(dá)水平也相對較高，盡管這一趨勢并未表現(xiàn)出統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性差異。有趣的是，在進(jìn)一步對比了依托于qPCR平臺所分別獲取的血液與組織樣本中PD-L1表達(dá)定量結(jié)果后，我們發(fā)現(xiàn)，僅有胃癌患者隊(duì)列表現(xiàn)出弱線性相關(guān)（p < 0.05）性，腸癌隊(duì)列則無論結(jié)腸癌還是直腸癌不同樣本中檢測的一致性均較差，提示血液PD-L1可能是一個(gè)獨(dú)立的評價(jià)指標(biāo)。
為了驗(yàn)證血液PD-L1表達(dá)水平的臨床意義與預(yù)測價(jià)值，本研究再次前瞻性招募了15例胃癌患者，所有患者治療前均按照上述實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)流程提供10 mL血液樣本并檢測了PD-L1表達(dá)狀況，然后接受了標(biāo)準(zhǔn)帕博利珠單抗（Pembrolizumab，可瑞達(dá)）治療。三個(gè)療程后，依據(jù)患者疾病進(jìn)展?fàn)顩r評估了患者對免疫治療藥物PD-1抑制劑的響應(yīng)率。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，相比于預(yù)后差組（疾病穩(wěn)定或疾病進(jìn)展），預(yù)后好組（疾病部分緩解）胃癌患者在接受治療前血中PD-L1表達(dá)水平明顯高于前者，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性（p < 0.05）。此外，這15名患者的ROC曲線數(shù)據(jù)顯示，基于血液PD-L1表達(dá)水平預(yù)測的胃癌患者響應(yīng)免疫治療幾率，其特異性與敏感性分別能夠達(dá)到75%和85.7%。
